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分光光度計的使用需要注意哪些細節(jié)呢?

更新時間:2020-04-16

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  分光光度計主要采用分光光度法,利用物質對某種波長的光具有選擇性吸收的特性以鑒別物質或測定其含量。能夠快速準確的測量核酸、蛋白質、細胞溶液的濃度。每次測量所需要的樣品量僅需0.5至2ul即可。直接將樣品點于加樣板上。無需比色杯或毛細管等附件。測量結束后,可以選擇直接將樣品擦去或者再用移液器回收樣品。所有步驟簡單快速,一氣呵成。
  使用分光光度計的注意事項都是什么?
  1)為了防止光電管疲勞:
  不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。
  2)比色皿的使用方法:
  ①拿比色皿時:
  手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
  ②清洗比色皿時:
  一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。如,比色皿被有機物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿,以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿,以免損傷它的透光面。每次做完實驗時,應立即洗凈比色皿。
  ③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干:
  以保護透光面。
  ④測定有色溶液吸光度時:
  一定要用有色溶液洗比色皿內壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差。
  ⑤在實際分析工作中:
  通常根據溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
  分光光度計的特點是只有一條光束。通過交換參比和樣品的位置,使其分別進入光路。在參比(溶劑)進入光路時,調零。然后將樣品進入光路的信號和參比信號進行比較,就可在顯示器上讀出樣品的透過率和吸光度。分光光度計由于在每個波長都需要變換參比和樣品的位置,所以只能手動,不能掃描吸收光譜。它的結構比較簡單,使用也有一定限制,但如配置程序控制和打印裝置,則對一些常規(guī)的定量測定還是比較適用的。

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